貨號 LP110 供貨周期 現貨 主要用途 慢病毒包裝 應用領域 生物產業,制藥 LP110-10規格 10T/kit LP110-20規格 20T/kit LP110-40規格 40T/kit
慢病毒是一種有包膜的RNA病毒,直徑為80-120 nm,呈二十面體對稱結構、球形。病毒顆粒最外層是包膜(包膜蛋白決定了感染細胞的類型),再往里依次為基質蛋白和衣殼,最里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉錄酶、整合酶和蛋白酶)。
慢病毒表達載體包含了包裝、轉染、穩定整合所需要的遺傳信息。慢病毒包裝質??商峁┌b重組慢病毒載體所需的所有輔助蛋白。為產生高滴度的病毒顆粒,需要利用表達載體和包裝質粒同時共轉染細胞,在細胞中進行病毒包裝,包裝好的假病毒顆粒分泌到細胞外的培養基中,離心取得上清液后,可以直接或濃縮后用于宿主細胞的感染。
慢病毒感染細胞的第一步是通過包膜蛋白與細胞表面受體結合。慢病毒與宿主細胞膜融合后釋放結構蛋白、酶蛋白和病毒核心。病毒RNA在逆轉錄酶的作用下逆轉錄并與整合酶形成整合前復合物。整合前復合物進入細胞核后,整合酶催化其整合至宿主基因組。整合后的DNA轉錄為mRNA,回到細胞漿中,表達目的蛋白或產生RNAi干擾。
ViralStars 慢病毒包裝試劑盒(LP110)屬于第二代慢病毒包裝體系,同時可兼容第二代和第三代慢病毒包裝質粒。慢病毒中的毒性基因已經被剔除并被外源性目的基因所取代,屬于假型病毒,即產生的慢病毒感染目的細胞后不會再感染其他細胞,也不會利用宿主細胞產生新的病毒顆粒。ViralStarsTM LP Lentivirus Packaging Kit包裝的慢病毒具有感染效率高、感染譜廣等特點,可實現外源基因在宿主細胞中的穩定持續表達。
ViralStars 慢病毒包裝試劑盒(LP110)包含如下組分:
(1) 優化配比的慢病毒包裝輔助質?;旌衔铮≒ackage Plasmid Mix),經過設計調整,可兼容大多數慢病毒表達載體,確保將重組子包裝成具有高感染率的慢病毒顆粒。
(2) 表達GFP 和 Puro標記的對照質粒(Control Plasmid),便于觀察病毒包裝效率及測定病毒滴度。
(3) 高效轉染試劑(PolyShooterTM Lentivirus Transfection Reagent),優化的配方特別適合于慢病毒包裝細胞系(HEK293T、HEK293FT等)的病毒包裝,具有高效低毒、操作簡單、重復性好等優點,能顯著提高慢病毒載體在慢病毒包裝細胞系中的包裝效率,并能產生更高滴度的重組慢病毒。
(4) 常用病毒感染增強試劑Polybrene,能夠顯著提高病毒與細胞的接觸及感染效率。